ДНК-микрочип
Материал из MachineLearning.
Строка 6: | Строка 6: | ||
В обычном ДНК микрочипе (н-р, производства Affymetrix) зонды прикрепляются к твердой поверхности — стеклянному или силиконовому чипу. Другие платформы, например, выпускаемые Illumina, используют микроскопические шарики вместо больших твердых поверхностей. | В обычном ДНК микрочипе (н-р, производства Affymetrix) зонды прикрепляются к твердой поверхности — стеклянному или силиконовому чипу. Другие платформы, например, выпускаемые Illumina, используют микроскопические шарики вместо больших твердых поверхностей. | ||
Технология ДНК-микрочипов находит самые разнообразные применения в современной биологии и медицине для анализа сложных смесей ДНК — например, совокупности всех транскриптов (матричных РНК) в клетке. ДНК микрочипы используют для анализа изменения [[экспрессия генов|экспрессии генов]], выявления [[SNP|однонуклеотидных полиморфизмов]], [[генотип]]ирования или повторного [[секвенирование|секвенирования]] мутантных [[геном]]ов. Микрочипы отличаются по конструкции, особенностям работы, точности, эффективности и стоимости. | Технология ДНК-микрочипов находит самые разнообразные применения в современной биологии и медицине для анализа сложных смесей ДНК — например, совокупности всех транскриптов (матричных РНК) в клетке. ДНК микрочипы используют для анализа изменения [[экспрессия генов|экспрессии генов]], выявления [[SNP|однонуклеотидных полиморфизмов]], [[генотип]]ирования или повторного [[секвенирование|секвенирования]] мутантных [[геном]]ов. Микрочипы отличаются по конструкции, особенностям работы, точности, эффективности и стоимости. | ||
+ | |||
+ | == Пример использования ДНК-микрочипа == | ||
+ | Ниже приводится пример эксперимента с использованием ДНК-микрочипа | ||
+ | # Выделяются или выращиваются биологические образцы, которые необходимо сравнить. Они могут соответствовать одним и тем же индивидуумам до и после какого-либо лечения (случай парных сравнений), либо различным группам индивидуумов, например, больным и здоровым, и т. д. | ||
+ | # Из образца выделяется очищенная нуклеиновая кислота, являющаяся объектом исследования: это может быть [[РНК]] в исследовании профиля [[экспрессия генов|экспрессии генов]] или [[ДНК]] при изучении сравнительной геномной гибридизации. Данный пример соответствует первому случаю. | ||
+ | # Проверяется качество и количество полученной нуклеиновой кислоты. Если требования соблюдены, эксперимент может быть продолжен. | ||
+ | # На основе имеющихся образцов [[РНК]] в процессе обратной транскрипции синтезируются последовательности комплементарной ДНК (кДНК, англ. cDNA). | ||
+ | # В процессе амплификации (синтеза дополнительных копий ДНК) количество последовательностей кДНК в образцах образцов многократно увеличивается. | ||
+ | # | ||
+ | # Полученные образцы смешиваются | ||
== Ссылки == | == Ссылки == | ||
* [http://en.wikipedia.org/wiki/DNA_microarray DNA microarray] - статья из английской Википедии | * [http://en.wikipedia.org/wiki/DNA_microarray DNA microarray] - статья из английской Википедии | ||
[[Категория:Биоинформатика]] | [[Категория:Биоинформатика]] |
Версия 12:19, 5 мая 2010
ДНК-микрочип (англ. DNA microarray) — это сложная технология, используемая в молекулярной биологии и медицине. ДНК-микрочип представляет собой небольшую поверхность, на которую с большой плотностью в определённом порядке нанесены фрагменты одноцепочечной синтетической ДНК с известной последовательностью. Эти фрагменты выступают в роли зондов, с которыми гибридизуются (образуют двуцепочечные молекулы) комплементарные им цепи ДНК из исследуемого образца, обычно меченные флуоресцентным красителем. Чем больше в образце молекул ДНК с определенной последовательностью, тем большее их количество свяжется с комплементарным зондом, и тем сильнее будет оптический сигнал в точке микрочипа, куда был «посажен» соответствующий зонд. После гибридизации поверхность микрочипа сканируется, и в результате каждой последовательности ДНК ставится в соответствие тот или иной уровень сигнала, пропорциональный числу молекул ДНК с данной последовательностью, присутствующих в смеси.
В обычном ДНК микрочипе (н-р, производства Affymetrix) зонды прикрепляются к твердой поверхности — стеклянному или силиконовому чипу. Другие платформы, например, выпускаемые Illumina, используют микроскопические шарики вместо больших твердых поверхностей. Технология ДНК-микрочипов находит самые разнообразные применения в современной биологии и медицине для анализа сложных смесей ДНК — например, совокупности всех транскриптов (матричных РНК) в клетке. ДНК микрочипы используют для анализа изменения экспрессии генов, выявления однонуклеотидных полиморфизмов, генотипирования или повторного секвенирования мутантных геномов. Микрочипы отличаются по конструкции, особенностям работы, точности, эффективности и стоимости.
Пример использования ДНК-микрочипа
Ниже приводится пример эксперимента с использованием ДНК-микрочипа
- Выделяются или выращиваются биологические образцы, которые необходимо сравнить. Они могут соответствовать одним и тем же индивидуумам до и после какого-либо лечения (случай парных сравнений), либо различным группам индивидуумов, например, больным и здоровым, и т. д.
- Из образца выделяется очищенная нуклеиновая кислота, являющаяся объектом исследования: это может быть РНК в исследовании профиля экспрессии генов или ДНК при изучении сравнительной геномной гибридизации. Данный пример соответствует первому случаю.
- Проверяется качество и количество полученной нуклеиновой кислоты. Если требования соблюдены, эксперимент может быть продолжен.
- На основе имеющихся образцов РНК в процессе обратной транскрипции синтезируются последовательности комплементарной ДНК (кДНК, англ. cDNA).
- В процессе амплификации (синтеза дополнительных копий ДНК) количество последовательностей кДНК в образцах образцов многократно увеличивается.
- Полученные образцы смешиваются
Ссылки
- DNA microarray - статья из английской Википедии